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Vision小助手
(CMVU)
早在1665年人类就借助光学显微镜发现、描述和定义了细胞,从而开启了生物学研究从宏观描述到微观定量的转变。虽然随着扫描电镜、扫描隧道显微镜及原子力显微镜等技术的出现,已经实现纳米级的分辨率,但是这些技术对样品破坏性较大,并不适合生物样品,尤其活体样品的观测。近十几年来,一系列适合生物样品成像的超分辨成像技术应运而生,例如结构光照明显微成像(以下简称SIM)等。
图1 高分辨率生物显微成像
SIM&NIR-II强强联合
SIM作为一种宽场显微成像技术,其原理是利用一系列结构光的发生装置(如光栅、空间调制器、数字微镜阵列DMD等)照明样品,将样品图像的高频信息通过莫尔效应转换到低频部分,再通过对频谱的分离和重组获得超分辨图像,经物镜投影在样品上,调制光产生的荧光信号再被相机接收。本质上,SIM是一种通过软件算法来提高图像分辨率的方法。
相较于受激辐射损耗显微技术(STED)和单分子定位显微技术(SMLM),SIM具有超分辨成像速度快、低光毒性、激发功率低和对荧光材料无特殊要求的优点,在活体细胞动态超分辨观测上得到了广泛的应用。
图2 结构光照明荧光显微技术
近红外二区荧光成像技术(以下简称NIR-II)相比可见光和NIR-I,具有更高的空间分辨率、更深的穿透生物基质深度、较低的光学吸收和散射以及较小的组织自发荧光现象。NIR-II对生物组织成像分辨率一般可达30um左右,能直接对细小的血管进行成像;穿透深度大致为2cm,即便是小鼠体内深处脏器发出的信号也能被检测到。
因此,NIR-II被认为是一种能够提供更高质量生物活体成像的技术,可以实现更深更精准的生物成像与检测,常应用于生物医学研究、活体生物原位成像、肿瘤检测、血管成像等领域。
图3 Ninox640SU 深度制冷红外InGaAs相机安装在显微镜上
科研人员们将SIM与NIR-II相结合后,形成了一种全新的生物组织成像技术。NIR-II可以有效扩展SIM硬件配置,两者强强联合能够实现对生物组织的超分辨率成像。
利用这种新型的成像技术,研究人员可以清晰地观察到生物组织内部的细微结构。例如,细胞的膜结构、细胞器以及神经纤维等,可以应用于生物组织的生理和病理过程研究、疾病的早期诊断和治疗等方面。
Ninox 640 SU 深度制冷红外InGaAs相机
InGaAs芯片,响应波长0.9-1.7um;PentaVac TM 真空技术,全金属密封;制冷温度-80℃,暗电流<300e - /p/s;曝光时间可达5分钟;实时图像NUC矫正,无需载入校准文件;CameraLink接口,易于系统集成和开发。
典型应用:近红外二区活体荧光成像、显微荧光成像、天文观测、太阳能电池检测、半导体检测、高光谱成像
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